Пцр и посев в чем разница

Методы диагностики ЗППП

Микробиологические исследования

Бактериоскопический метод (мазок на инфекции)

При бактериоскопическом методе анализ выполняется с помощью светового микроскопа. Исследуемый материал вносят в каплю физраствора, тщательно размешивают и распределяют по стеклу. Должно наступить хорошее окрашивание частей клеток и бактерий в разные цвета, чтобы оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.

Перед сдачей мазка лучше воздержаться от мочеиспускания.

Бактериологический метод (бакпосев)

Бакпосев – метод диагностики ЗППП путем выращивания микробов в благоприятной для этого среде. Он является золотым стандартом в определении инфекций, поскольку выявляет не только вирус, но и его активность. Преимуществом данного метода является возможность не только выявить бактерию, но и возможность получить антибиотикограмму, на основе которой врач назначает точное лечение. Наиболее часто бакпосев используют для диагностики уреаплазмоза, микопламзоза, трихомониаза, хламидиоза, различных форм кандидоза.

Правила сдачи анализа на бакпосев:

Молекулярная диагностика

Серологические и иммунохимические исследования

ПИФ предусматривает прямое выявление антигенов хламидий.

ПИФ-метод является важнейшим скриниговым методом диагностики урогенитального хламидиоза.

Показания к назначению анализа:

Подготовка к исследованию: У женщин взятие биологического материала лучше всего проводить не ранее чем через 14 дней после менструации. Перед взятием материала пациентам рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.

Материал для исследования: соскоб из уретры или цервикального канала, осадок мочи, секрет предстательной железы.

Недостатком данного метода является частота ложноположительных результатов на хламидиоз. При использовании метода прямой иммунофлюоресценции ложноположительный диагноз урогенитального хламидиоза ставится у 36% пациентов. В зарубежной практике установленный по ПИФ диагноз принято подтверждать с помощью культурального исследования.

Иммуноферментный анализ нацелен на выявление антител в крови. Соответственно, чем больше титр, тем больше антител к тому или иному инфекционному заболеванию. IgG – антитела говорят о перенесенном в прошлом инфекционном заболевании, а IgМ – антитела говорят о наличии острого инфекционного процесса. ИФА позволяет диагностировать:

Источник

Анализы на ЗППП — виды, особенности проведения, правила подготовки

ЗППП анализы — это отдельный вид лабораторных исследований, направленных на обнаружение инфекционных заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), в ходе проведения клинической диагностики.

К списку таких заболеваний традиционно относятся: ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), генитальный герпес, гонорея, микоплазмоз, папилломавирусная инфекция, сифилис, трихомониаз, уреаплазмоз, хламидиоз, цитомегаловирус.

Показания

Необходимость проведения анализов на ЗППП возникает при наличии обоснованных подозрений заражения (половой контакт с носителем ЗППП), а также возникновении симптомов, которые могут свидетельствовать об инфицировании:

сыпь, зуд или покраснение кожи в генитальной области;

боль и жжение во время мочеиспускания;

примеси крови в моче;

генитальные выделения жёлтого или белого цвета с резким неприятным запахом;

болевой синдром в области половых органов или брюшной полости;

бесплодие или половые дисфункции (как часть комплексной диагностики).

Виды анализов ЗППП

Существует 4 основных анализа на ЗППП: мазок, бакпосев, ИФА, ПЦР. Выбор конкретного типа исследования делает врач, исходя из жалоб пациента и общей клинической картины.

Мазок

Исследуемый материал — верхний слой слизистой оболочки мочеиспускательного канала у мужчин или влагалища и цервикального канала у женщин. Отобранные образцы изучаются под микроскопом, а результат может быть получен в течение 30-60 минут.

Исследование позволяет выявить таких возбудителей ЗППП, как гарднереллы, гонококки, трихомонады, уреаплазмы, хламидии, а также ряд грибковых инфекций.

Недостатки: малоинформативно на начальных стадиях ЗППП.

Бакпосев

Исследуемый материал — кровь, моча, кал, слюна, генитальные выделения. Отобранные образцы помещаются в специальную питательную среду, способствующую активному размножению предполагаемого возбудителя для последующего его изучения. Результат может быть получен через 3-10 дней, в зависимости от особенностей анализа.

Исследование помогает не только установить наличие в организме конкретного возбудителя, но и определить его чувствительность к определённым группам антибиотиков. Бакпосев эффективен для обнаружения гарднерелл, гонококков, кандидоза, микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомонад.

Недостатки: применим только к инфекциям, которые можно вырастить в питательных средах.

ИФА (иммуноферментный анализ)

Исследуемый материал — кровь, моча, урогенитальные соскобы. Суть анализа — обнаружение в образцах специальных защитных веществ-антител, которые всегда выделяются организмом в ответ на присутствие патогенного возбудителя. Результат может быть получен в течение суток.

Применяется для обнаружения практически любых возбудителей ЗППП, однако в силу высокой специфичности исследования требует постановки предварительного диагноза, то есть уточнения патогена, который должен выявить анализ.

Недостатки: исследования не всегда информативны на ранних стадиях ЗППП, поскольку на некоторые инфекции организм вырабатывает антитела не сразу.

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Исследуемый материал — кровь, моча, урогенитальные соскобы или выделения. Суть метода — выявление фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в исследуемом образце. Результат может быть получен через 3-4 часа.

Позволяет с абсолютной точностью обнаружить присутствие в организме любого возбудителя ЗППП, вне зависимости от стадии заболевания.

Недостатки: провести такой анализ можно не в каждой лаборатории.

Как подготовиться к сдаче анализов

Правила подготовки к сдаче анализов на ЗППП зависят от вида предстоящего исследования.

Общие рекомендации. Кровь и моча всегда сдаются утром натощак или минимум через 8 часов после употребления пищи. Приём лекарственных препаратов в период проведения анализов ЗППП — только по согласованию с врачом.

Мазок, посев. За 1-2 дня до сдачи образцов отказаться от половых контактов и гигиенических процедур с применением мыла или средств интимной гигиены (включая спринцевание у женщин).

ИФА. За 24 часа до сдачи материала отказаться от спиртного, а также обильного употребления жирной пищи. За час до сдачи образцов — воздержаться от курения.

ПЦР. При сдаче урогенитальных жидкостей (сперма, секрет предстательной железы и пр.) рекомендуется половое воздержание в течение 2-3 суток. Образцы слюны сдаются утром натощак, до выполнения любых гигиенических процедур по санации полости рта.

Интерпретация результатов

Правильно интерпретировать результаты анализов может только лечащий врач, с учётом истории болезни пациента, а также наличия у него других заболеваний. Самостоятельное трактование исследований на ЗППП по «советам из интернета» чревато неточностями и неверным пониманием фактического состояния больного.

Источник

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ ПОСЕВ (БАКАНАЛИЗ) В ГИНЕКОЛОГИИ И УРОЛОГИИ

Содержание Бакпосев как ценный диагностический инструментЧто показывают мазки и посевыЧем отличаются мужские и женские мазкиПочему необходим баканализОборудование для подготовки и проведения анализа Бакпосев как ценный диагностический инструмент Диагностика при наличии неспецифических симптомов требует особо чувствительных и точных методов. В гинекологии и урологии доктора часто сталкиваются с проявлениями болезни, которые можно трактовать по-разному. Например, это: боль при мочеиспускании или после него;отечность и краснота половых органов, высыпания;воспалительные заболевания мочеполовой системы (уретрит, простатит, везикулит и т.д.);подозрение на любые инфекции (гонорея, микоплазмоз, хламидиоз, трихомониаз и т.д.);бесплодие;профилактическое обследование;выявление инфекции у партнера. Качественный и количественный состав микрофлоры слизистых оболочек является ценным диагностическим материалом. Поэтому значение бактериологического посева в постановке диагноза и мониторинге лечения очень высоко. Что показывают мазки и посевы Посевы и мазки отделяемого разных органов используют гинекологи, урологи, отоларингологи, дерматологи, офтальмологи, хирурги, маммологи. Что касается гинекологии и урологи, то здесь микробиологические исследования незаменимы. У женщин исследуется влагалище и шейка матки, у мужчин — мочеиспускательный (уретральный) канал. Основные виды исследований — общий мазок на флору и обнаружение инфекций. Микроскопия мазка на флору показывает: количество лейкоцитов;наличие бактерий;присутствие внутриклеточных паразитов;наличие и простейших, грибов. В силу анатомических отличий взятие материала для мазка и посева происходит по-разному у мужчин и женщин. Чем отличаются мужские и женские мазки В гинекологии при взятии мазков применяется цитощетка. Это простое приспособление позволяет сделать соскоб нужной глубины со стенок влагалища. Используя гинекологическое зеркало, врач получает пробы с разных участков влагалища. Для взятия мазков у мужчин применяется зонд урогенитальный типа А. Он вводится в мочеиспускательный канал на глубину нескольких сантиметров. Полученный материал помещается на предметное стекло. Теперь его можно исследовать под микроскопом. Окрашенные мазки дают более полную информацию. Например, чтобы дифференцировать флору на грампложительную и грамотрицательную, понадобится набор для окраски мазков по Граму. Азур-Эозин по Романовскому позволяет тщательно прокрасить мазки и увидеть морфологию клеток. Эти и другие химические реактивы представлены в каталоге на сайте Апекслаб https://apexlab.ru/category/ Почему необходим баканализ При всей информативности, мазок не позволяет конкретно определить вид присутствующих бактерий. Например, виды коков (стафилококк, стрептококк) в поле зрения светового микроскопа выглядят одинаково. В норме на слизистых присутствуют сотни видов разных бактерий: лактобактерии;бифидобактерии;бактероиды;пропионибактерии;порфиромонады;превотеллы;пептострептококки;коринеформные бактерии. Для адекватной диагностики требуется выделение чистой культуры микроорганизма при помощи посева. Оборудование для подготовки и проведения анализа Современные методы позволяют определить виды патогенной флоры и их количество. Тампон-зонд с транспорной средой amies с углем позволит не только безопасно взять у пациента пробы, но и в целости доставить их в баклабораторию для посева. Наряду с суперсовременным методом ПЦР не утратили актуальности классические посевы на агаре. Для работы по методике используются: микробактериальная петля (нанесение пробы на питательную среду);пипетка Пастера (дозированный отбор жидкого материала);стеклянная палочка (вспомогательный инструмент при размешивании и взятии проб, окраски мазков). Интерпретация результатов в комплексе с клинической картиной помогает диагностировать дисбиотические нарушения состава микрофлоры, причины воспалительных процессов, появление атипичных микроорганизмов.

Апекслаб, ООО Лабораторное оборудование и материалы

Содержание

Бакпосев как ценный диагностический инструмент

Диагностика при наличии неспецифических симптомов требует особо чувствительных и точных методов. В гинекологии и урологии доктора часто сталкиваются с проявлениями болезни, которые можно трактовать по-разному. Например, это:

Качественный и количественный состав микрофлоры слизистых оболочек является ценным диагностическим материалом. Поэтому значение бактериологического посева в постановке диагноза и мониторинге лечения очень высоко.

Что показывают мазки и посевы

Посевы и мазки отделяемого разных органов используют гинекологи, урологи, отоларингологи, дерматологи, офтальмологи, хирурги, маммологи. Что касается гинекологии и урологи, то здесь микробиологические исследования незаменимы.

У женщин исследуется влагалище и шейка матки, у мужчин — мочеиспускательный (уретральный) канал. Основные виды исследований — общий мазок на флору и обнаружение инфекций.

Микроскопия мазка на флору показывает:

В силу анатомических отличий взятие материала для мазка и посева происходит по-разному у мужчин и женщин.

Чем отличаются мужские и женские мазки

В гинекологии при взятии мазков применяется цитощетка. Это простое приспособление позволяет сделать соскоб нужной глубины со стенок влагалища. Используя гинекологическое зеркало, врач получает пробы с разных участков влагалища.

Для взятия мазков у мужчин применяется зонд урогенитальный типа А. Он вводится в мочеиспускательный канал на глубину нескольких сантиметров.

Полученный материал помещается на предметное стекло. Теперь его можно исследовать под микроскопом. Окрашенные мазки дают более полную информацию. Например, чтобы дифференцировать флору на грампложительную и грамотрицательную, понадобится набор для окраски мазков по Граму. Азур-Эозин по Романовскому позволяет тщательно прокрасить мазки и увидеть морфологию клеток. Эти и другие химические реактивы представлены в каталоге на сайте Апекслаб https://apexlab.ru/category/

Почему необходим баканализ

При всей информативности, мазок не позволяет конкретно определить вид присутствующих бактерий. Например, виды коков (стафилококк, стрептококк) в поле зрения светового микроскопа выглядят одинаково. В норме на слизистых присутствуют сотни видов разных бактерий:

Для адекватной диагностики требуется выделение чистой культуры микроорганизма при помощи посева.

Оборудование для подготовки и проведения анализа

Современные методы позволяют определить виды патогенной флоры и их количество. Тампон-зонд с транспорной средой amies с углем позволит не только безопасно взять у пациента пробы, но и в целости доставить их в баклабораторию для посева.

Наряду с суперсовременным методом ПЦР не утратили актуальности классические посевы на агаре. Для работы по методике используются:

Интерпретация результатов в комплексе с клинической картиной помогает диагностировать дисбиотические нарушения состава микрофлоры, причины воспалительных процессов, появление атипичных микроорганизмов.

Источник

Диагностика инфекционных заболеваний

Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.

У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.

Бактериологические методы исследования

Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.

Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.

Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.

Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.

Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.

Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видов микроорганизмов в биологическом материале, а также дают предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.

Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму

Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 часов. Затем чашки Петри просматривают. Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры. Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.

Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.

Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов, имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.

Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.

Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.

Серологические методы исследования

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.

1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.

С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики. При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентом в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G. При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.

2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.

Серологические исследования не обладают 100%-й чувствительностью и специфичностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.

В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.

Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях.

Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.

Метод полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать.

Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы.

Источник