Пцр микоплазма что это
Пцр микоплазма что это
Качественный молекулярно-генетический метод исследования, который позволяет выявить ДНК бактерий рода Mycoplasma в исследуемом материале и установить факт инфицирования данными микроорганизмами.
Возбудитель микоплазмоза, микоплазма.
Посев на Mycoplasma hominis, DNA.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Секрет простаты, первую порцию утренней мочи, соскоб урогенитальный, эякулят.
Общая информация об исследовании
Микоплазмы – прокариотические микроорганизмы маленьких размеров, которые не имеют клеточной стенки. Они являются самыми маленькими из всех известных клеточных организмов: диаметр клетки составляет 0,1 мкм, что в десять раз меньше размеров кишечной палочки. Известно около 100 видов микоплазм, которым свойственен сапрофитный или паразитический способ существования. В патологии человека доказана роль нескольких видов: M. pneumoniae, M. genitalium, M. hominis, M. fermentalis, M. arthritidis.
Некоторые сапрофитные виды микоплазм обитают на слизистых и часто выявляются в ротовой полости и мочеполовом тракте здоровых людей. Бактерии, которые проникли через защитный барьер кожи и слизистых, способны жить и размножаться в различных тканях и жидкостях организма (крови, синовиальной, спинномозговой жидкости) и внутри клеток. Благодаря особенностям структуры клетки и отсутствию пептидогликановой клеточной стенки микоплазмы отличаются устойчивостью к действию бета-лактамных антибиотиков, способны уклоняться от защитных механизмов иммунной системы, жить внутри лейкоцитов и проникать с ними через различные тканевые барьеры.
Наиболее изученным видом является M. pneumoniae – возбудитель атипичной пневмонии (респираторного микоплазмоза) и других болезней органов дыхания.
В воспалительных заболеваниях органов малого таза, патологии плода и новорождённых имеют значение M. genitalium и M. hominis. Инфицирование происходит преимущественно при половом контакте. Данные организмы рассматриваются в качестве вероятного этиологического фактора некоторых случаев цистита, негонококкового уретрита у мужчин, цервицита и воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин. Урогенитальный микоплазмоз не имеет специфических клинических признаков и чаще подозревается в случаях хронических вялотекущих воспалительных заболеваний мочеполовых органов, резистентных к стандартной антибиотикотерапии.
Вертикальный путь передачи инфекции (от матери плоду) и инфицирование при прохождении ребенком родовых путей в некоторых случаях является вероятной причиной преждевременных родов и патологии легких, бактериемии, менингита и сепсиса у новорождённых.
Некоторые клиницисты ставят под сомнение роль микоплазм в развитии воспалительных заболеваний урогенитального тракта, что объясняется сложностью выделения данных видов микроорганизмов и подтверждения их присутствия, а также частым обнаружением сразу нескольких бактериальных агентов. Однако многочисленные исследования показывают значимую связь между присутствием микоплазм и различными инфекционно-воспалительными состояниями.
M. genitalium обнаруживается в моче некоторых пациентов с острым пиелонефритом и, возможно, в 5 % случаев является возбудителем данной патологии. Микоплазменная инфекция не вызывает вульвовагиниты, однако, вероятно, играет некоторую роль в течении бактериального вагиноза. Этот микроорганизм присутствует у 10 % женщин с воспалением придатков.
Наличие микоплазм подтверждается культуральным или молекулярно-генетическим методом. Однако на питательных средах микроорганизмы растут медленно, и результат может быть получен только через несколько недель. Определение генетического материала микоплазм с помощью ПЦР отличается высокой специфичностью и чувствительностью, а также быстрым получением результата. Оно позволяет выявить ДНК различных видов из рода микоплазм и установить факт инфицирования данными бактериями.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата:
Причины отрицательного результата:
Микоплазма, ДНК (Mycoplasma genitalium, ПЦР) соскоб, кол. в Москве
Приём и исследование биоматериала
Комплексы с этим исследованием
Когда нужно сдавать анализ Микоплазма, ДНК (Mycoplasma genitalium, ПЦР) соскоб, кол.?
Подробное описание исследования
Исследование выполняется методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени и позволяет определить количество ДНК Mycoplasma genitalium в урогенитальном соскобе. Используется для диагностики микоплазменной инфекции, при привычном невынашивании беременности, бесплодии.
Mycoplasma genitalium – патогенный микроорганизм, способный вызывать уретрит у представителей обоих полов, цервицит и воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ) у женщин. Это наиболее патогенный представитель микоплазм: возбудитель способен прикрепляться к клеткам эпителия и разрушать их.
M. genitalium обладают тропизмом к цилиндрическому эпителию, поражают слизистую оболочку уретры и цервикального канала. Инфицирование микоплазмозом у взрослых происходит половым путем, у детей — интранатальным (во время родов).
При отсутствии адекватного лечения и хроническом течении заболевания развивается бесплодие. Симптомы инфекции чаще отсутствуют и появляются только при снижении иммунитета или при инфицировании другими патогенными микроорганизмами (хламидиями, гонококками и т. д.).
В связи с тем, что микоплазма не видима в микроскоп и относится трудно культивируемым микроорганизмам, для диагностики инфекции рекомендуется ПЦР-исследование.
Mycoplasma spp., ДНК [ПЦР]
Качественный молекулярно-генетический метод исследования, который позволяет выявить ДНК бактерий рода Mycoplasma в исследуемом материале и установить факт инфицирования данными микроорганизмами.
Возбудитель микоплазмоза, микоплазма.
Mycoplasma spp., DNA.
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Мазок урогенитальный, первую порцию утренней мочи, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), эякулят.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Микоплазмы – прокариотические микроорганизмы маленьких размеров, которые не имеют клеточной стенки. Они являются самыми маленькими из всех известных клеточных организмов: диаметр клетки составляет 0,1 мкм, что в десять раз меньше размеров кишечной палочки. Известно около 100 видов микоплазм, которым свойственен сапрофитный или паразитический способ существования. В патологии человека доказана роль нескольких видов: M. pneumoniae, M. genitalium, M. hominis, M. fermentalis, M. arthritidis.
Некоторые сапрофитные виды микоплазм обитают на слизистых и часто выявляются в ротовой полости и мочеполовом тракте здоровых людей. Бактерии, которые проникли через защитный барьер кожи и слизистых, способны жить и размножаться в различных тканях и жидкостях организма (крови, синовиальной, спинномозговой жидкости) и внутри клеток. Благодаря особенностям структуры клетки и отсутствию пептидогликановой клеточной стенки микоплазмы отличаются устойчивостью к действию бета-лактамных антибиотиков, способны уклоняться от защитных механизмов иммунной системы, жить внутри лейкоцитов и проникать с ними через различные тканевые барьеры.
Наиболее изученным видом является M. pneumoniae – возбудитель атипичной пневмонии (респираторного микоплазмоза) и других болезней органов дыхания.
В воспалительных заболеваниях органов малого таза, патологии плода и новорождённых имеют значение M. genitalium и M. hominis. Инфицирование происходит преимущественно при половом контакте. Данные организмы рассматриваются в качестве вероятного этиологического фактора некоторых случаев цистита, негонококкового уретрита у мужчин, цервицита и воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин. Урогенитальный микоплазмоз не имеет специфических клинических признаков и чаще подозревается в случаях хронических вялотекущих воспалительных заболеваний мочеполовых органов, резистентных к стандартной антибиотикотерапии.
Вертикальный путь передачи инфекции (от матери плоду) и инфицирование при прохождении ребенком родовых путей в некоторых случаях является вероятной причиной преждевременных родов и патологии легких, бактериемии, менингита и сепсиса у новорождённых.
Некоторые клиницисты ставят под сомнение роль микоплазм в развитии воспалительных заболеваний урогенитального тракта, что объясняется сложностью выделения данных видов микроорганизмов и подтверждения их присутствия, а также частым обнаружением сразу нескольких бактериальных агентов. Однако многочисленные исследования показывают значимую связь между присутствием микоплазм и различными инфекционно-воспалительными состояниями.
M. genitalium обнаруживается в моче некоторых пациентов с острым пиелонефритом и, возможно, в 5 % случаев является возбудителем данной патологии. Микоплазменная инфекция не вызывает вульвовагиниты, однако, вероятно, играет некоторую роль в течении бактериального вагиноза. Этот микроорганизм присутствует у 10 % женщин с воспалением придатков.
Наличие микоплазм подтверждается культуральным или молекулярно-генетическим методом. Однако на питательных средах микроорганизмы растут медленно, и результат может быть получен только через несколько недель. Определение генетического материала микоплазм с помощью ПЦР отличается высокой специфичностью и чувствительностью, а также быстрым получением результата. Оно позволяет выявить ДНК различных видов из рода микоплазм и установить факт инфицирования данными бактериями.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата:
Причины отрицательного результата:
Что может влиять на результат?
Кто назначает исследование?
Акушер-гинеколог, уролог, инфекционист.
Литература
Подписка на новости
Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed
Микоплазма, ДНК (Mycoplasma hominis, ПЦР) соскоб, кач. в Москве
В ходе анализа выявляется генетический материал Mycoplasma hominis в биоматериале. Анализ проводят в целях диагностирования микоплазменной инфекции.
Приём и исследование биоматериала
Комплексы с этим исследованием
Когда нужно сдавать анализ Микоплазма, ДНК (Mycoplasma hominis, ПЦР) соскоб, кач.?
Подробное описание исследования
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, посредством которого можно установить наличие определенного генетического материала, принадлежащего возбудителю инфекции в образце на самых ранних стадиях заболевания. Используется для ранней диагностики заболеваний, вызванных Mycoplasma hominis (через 7-10 дней от момента полового контакта).
Mycoplasma hominis — условно-патогенный микроорганизм. Это значит, что он может в норме присутствовать в микрофлоре, но при определенных условиях (неблагоприятные внешние воздействия, ослабление иммунитета) способен провоцировать воспалительные изменения. Микоплазмы населяют слизистые оболочки человека: у женщин — влагалище, шейку матки, уретру, у мужчин — уретру и крайнюю плоть.
При проявлении патогенных свойств микоплазмы вызывают воспаление половых органов. Наиболее часто возникают:
Так называются воспаления шейки матки, уретры, слизистой оболочки матки и влагалища, соответственно.
Эти заболевания при неблагоприятном стечении обстоятельств могут привести к бесплодию, невынашиванию беременности и преждевременным родам. Поэтому проведение этого анализа особенно важно беременным и планирующим беременность женщинам. Также микоплазмоз связан с мужским бесплодием. Существуют данные, что микоплазмы являются одним из факторов развития рака предстательной железы у мужчин.
Источником инфекции является больной человек или бессимптомный носитель. Пути передачи заболевания:
Лаборатория «Гемотест» для диагностики микоплазменной инфекции использует метод ПЦР, который, благодаря своей чувствительности и специфичности, может быть использован в качестве диагностического теста для урогенитального микоплазмоза. В качестве биоматериала используется соскоб со стенки влагалища или уретры (мазок).
Микоплазмы/уреаплазмы: способы диагностики
Методы диагностики инфекций
Для диагностики инфекций существуют прямые и непрямые методы. Прямые методы позволяют выявить инфекционный агент в материале. К ним относится ПЦР, бактериологическое исследование, микроскопия и другие. К непрямым относится определение антител в крови (то есть определение не самого инфекционного агента, а иммунного ответа на него), выявление биохимических маркеров и т.д.. Для каждой инфекции существует свой стандарт диагностики.
Уреаплазмы
Уреаплазмы (Ureaplasma) – представители класса Mollicutes, семейства Mycoplasmataceae. Семейство включает в себя несколько родов, в том числе, род Ureaplasma и род Mycoplasma. Таким образом, можно выделить несколько видов генитальных микоплазм: U. Urealyticum (биовар 2, включает в себя несколько серотипов – 2, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13), U. Parvum (биовар 1, включает в себя несколько серотипов – 1, 3, 6, 14), M. hominis и M. Genitalium. Подробнее: Taxonomy Browser
Ни одна группа прокариот не была вовлечена в такое количество споров и дискуссий, как эта. Даже несмотря на растущие объемы данных об их инфекционном и патогенетическом потенциале, микоплазмы все еще вызывают впечатление группы таинственных микроорганизмов. Однако они являются эволюционно продвинутыми прокариотами и их элитный статус бактериальных патогенов «следующего поколения» требует новых парадигм для полного понимания их патогенного потенциала.
Микоплазмы являются самыми мелкими известными бактериями. Микоплазмы – потомки грам-положительных бактерий, в процессе эволюции сократившие свой геном и лишившиеся клеточной стенки. Отсутствие ригидной клеточной стенки позволяет им проходить через мельчайшие отверстия, быть устойчивыми к антибиотикам, действующим на клеточную стенку. Геном микоплазм – пример крайней биологической экономичности. Отсутствие многих важных генов ведет к тому, что микоплазмы ведут паразитический образ жизни, они зависимы от поставок таких веществ как аминокислоты, нуклеотиды, жирные кислоты и так далее. Их жизнь зависит от клеток организма, в котором они обитают.
Уреаплазма передается преимущественно половым путем. Инфицированность женщин, живущих половой жизнью, достигает 60-80. Уреаплазма часто не вызывает заболеваний, но ее наличие имеет значение для беременных женщин и женщин, планирующих беременность, для новорожденных, а также при наличии клинической картины заболевания.
Основные методы выявления уреаплазм – прямые. Определение антител к уреаплазмам практически не используется.
ПЦР: быстрый метод с высокой чувствительностью и 100% специфичностью*, возможность определения вида уреаплазмы. Типирование уреаплазмы является важным, так как каждый из видов имеет свою клиническую значимость. Кроме того, при ПЦР-диагностике, в отличие от посева, определяются не только живые, но и мертвые микроорганизмы. * 100 % специфичность означает, что если результат положительный, то уреаплазма присутствует в пробе. Высокая чувствительность означает, что при минимальном количестве уреаплазм в пробе они могут быть определены данным методом.
Бактериологическое исследование (культуральный метод, выделение культуры уреаплазм) является менее чувствительным методом, не позволяет определить вид уреаплазмы, кроме того, тест проводится дольше ПЦР. Особенности строения и физиологии уреаплазм, о которых написано выше, делают анализ довольно сложным: микоплазмы очень капризны, они трудно культивируются, для них требуется специальные среды, они плохо переносят транспортировку. Даже в идеальных условиях научной лаборатории чувствительность не достигает высоких цифр (до 50%), специфичность могла бы достигать 100%, если бы не присутствовал фактор субъективности в оценке микробиологических препаратов. M.genitalium культивируется сложнее других микоплазм, очень медленно растет на питательных средах, поэтому посевы не применяются в клинической практике.
Сравнение чувствительности:
Кратко
Полная статья
К достоинствам бактериологического метода относят определение титра уреаплазм и возможность определить чувствительность к антибиотикам.
Попробуем разобраться с этими тезисами. Рекомендации по поводу назначения лечения («Междисциплинарный российский консенсус по генитальным микоплазмам» (2006 г.) ) включают в себя назначение лечения при титре уреаплазм более 10^4 КОЕ/мл (цифра, получаемая в результате бактериологического исследования). Предполагается, что полученный титр соответствует содержанию уреаплазм в организме. Реально же при бактериологическом исследовании определяется количество в забранном материале, а это не то же самое, что количество во влагалище. Это зависит и от качества соскоба, и от количества слизи, и от многих других факторов. Кроме того, концентрация уреаплазм меняется в течение менструального цикла, зависит от приема лекарственных средств и т.д. Поэтому количественный анализ на уреаплазмы является довольно условным методом и его результат не должен быть основанием для назначения или неназначения лечения.
Посевы с определением чувствительности (резистограммой) используются только в научных целях для выработки оптимальных принципов лечения микробных ассоциаций. Это связано с тем, что микоплазмы относятся к трудным для культивирования микроорганизмам, плохо переносящих транспортировку и требующих особых условий для культивирования. Еще одной проблемой является очень медленное размножение некоторых микоплазм в культуре (например, M. genitalium). Определение чувствительности к антибиотикам in vitro не отражает реальной ситуации чувствительности или устойчивости всей микробной ассоциации к антибиотикам in vivo, поэтому не может являться методом исследования, на основании которого будет назначаться лечение.
Когда проводить обследование?
Показания к обследованию на микоплазмы (уреаплазмы):
Учитывая значимость микоплазм в развитии воспалительных процессов мочеполовых органов у мужчин и женщин, риски связанные с ролью кольпита и баквагиноза в развитии преждевременного излития вод и некоторых других осложнений беременности, предпочтительным методом обследования является ПЦР.
В западных рекомендациях при наличии признаков воспалительных заболеваний органов малого таза или бактериального вагиноза рекомендуется проведение следующих анализов: микроскопия отделяемого (гинекологический мазок у женщин или мазок из уретры у мужчин), мазки для выявления гонококков, трихомонад, хламидий. Мы рекомендуем проводить более чувствительную ПЦР-диагностику этих инфекций. При явной клинической симптоматике воспалительного заболевания в отсутствии гонококков, трихомонад и хламидий говорят о так называемых нехламидийных негонококковых уретритах и других воспалительных процессах.
Выделение нехламидийных негонококковых воспалителных процессов является очень важным в клиническом отношении, поскольку подчеркивает значение микробных ассоциаций в развитии воспаления. Очень трудно бывает выделить отдельно роль каждого микроорганизма в развитии воспалительного процесса. Общее лечение бактериального вагиноза приводит к значительному уменьшению популяций потенциально патогенных микробов. Поэтому при микробных ассоциациях с участием микоплазм значительное улучшение часто наступает при применении препаратов метронидазола или клиндамицина, напрямую не действующих на микоплазмы, но устраняющих условия для благоприятного выживания микоплазм в организме.
«Лечить или не лечить?»
Лечение при положительном результате ПЦР (уреаплазмопозитивности) или бактериологического исследования (посева) нужно не всегда. На первом месте должна быть степень клинических проявлений воспалительного процесса и клинический контекст (например, беременность, наличие активности воспалительного процесса органов малого таза, выделений, симптомов уретрита и т. д.).
Для каждого случая необходимость лечения должна оцениваться лечащим врачом. Решение о лечении принимается на основе оценки клинической картины и комплекса данных обследования.
Лечение назначается не на основании резистограммы, а на основании рекомендаций лечения негонококковых нехламидийных воспалительных процессов, вызванных микробными ассоциациями с участием микоплазм. Центр иммунологии и репродукции регулярно отслеживает публикации, посвященные изучению чувствительности таких микробных ассоциаций к антибактериальным препаратам, и использует эти данные в своей практике. В связи с устойчивостью микроорганизмов к антибиотикам и сильной зависимостью от общего состояния микрофлоры не всегда удается добиться эрадикации микроорганизмов даже при назначении современных схем лечения. Слишком настойчивое лечение микоплазм может привести к осложнениям лечения.