селенопиран что это такое

Селен: функции, формы и нормы потребления

Краткая информация о биодоступной форме селена и его нормах потребления

Формы селена

Селен является микроэлементом, который естественным образом присутствует во многих продуктах питания, добавляется к другим и доступен в качестве пищевой добавки. Селен, жизненно важный для человека, является составной частью более двух десятков селенопротеинов, которые играют критическую роль в воспроизводстве и метаболизме гормонов щитовидной железы, репродуктивной функции, синтезе ДНК и защите от окислительного повреждения и инфекций.

Селен существует в двух формах: неорганической (селенат и селенит) и органической (селенометионин и селеноцистеин). Обе формы могут быть хорошими диетическими источниками селена. Почвы содержат неорганические селениты и селенаты, которые растения накапливают и преобразуют в органические формы, в основном селеноцистеин и селенометионин и их метилированные производные.

Большая часть селена находится в форме селенометионина в тканях животных и человека, где он может быть неспецифично включен в аминокислоту метионин в белках организма. Скелетная мышца является основным местом хранения селена, на ее долю приходится примерно от 28% до 46% общего пула селена. Как селеноцистеин, так и селенит восстанавливаются с образованием селенида водорода (селеноводорода, H₂Se –ред.), который, в свою очередь, превращается в селенофосфат для биосинтеза селенопротеина.

Органический селен в пробиотиках

Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что бифидо- и пропионовокислые бактерии являются наиболее перспективными объектами для биотехнологического получения органической формы селена, что повышает биодоступность данного микроэлемента и значительно понижает его токсичность.

Органическая форма селена. Необходимо подчеркнуть, что большая часть селена в животных тканях присутствует в виде селенометионина и селеноцистеина, т.е. органическая форма селена заключена в химической связи с аминокислотами

Применительно к остатку селеноцистеина механизм такого включения детально исследован. Установлено, что он определяется наличием в составе мРНК триплета UGA в сочетании со специфическим нетранслируемым петлевым фрагментом Se-CYS. В процессе включения остатка селеноцистеина в белок участвует специфическая сериновая UGA-тРНК длиной 95 нуклеотидов и 4 фактора трансляции Sel-A, В, С и D. У прокариот этот нуклеотидны участок расположен в непосредственной близости от триплета UGA в отличие от эукариот. Селенсодержащие белки входят в состав внутриклеточной гидрофильной макромолекулярной (белковой) фракции биомассы. Следует отметить, что селенометионин не синтезируется высшими организмами и единственным источником является биомасса прокариот и дрожжей. Вероятно этим объясняется способность бифидобактерий и пропионовокислых бактерий, как микроорганизмов прокариотической природы, накапливать селен.

В ходе экспериментальных исследований было установлено, что обогащение пробиотических микроорганизмов в процессе культивирования селенитом натрия способствует повышению их антимутагенной активности. При обогащении селеном антимутагенная активность пробиотических микроорганизмов повышается и достигает максимального значения 83% для пропионовокислых бактерий и 59,6% для бифидобактерий при концентрации селенита натрия 20 мкг/мл.

Селеновый статус

Наиболее часто используемыми показателями статуса селена являются концентрации селена в плазме и сыворотке. Концентрации в крови и моче отражают недавнее потребление селена. Анализы содержания селена в волосах или ногтях можно использовать для мониторинга долгосрочного потребления в течение месяцев или лет. Количественная оценка одного или нескольких селенопротеинов (таких как глутатионпероксидаза и селенопротеин Р) также используется в качестве функциональной меры селенового статуса. Концентрация селена в плазме или сыворотке, равная 8 микрограмм (мкг) / дл или выше у здоровых людей, обычно отвечает потребностям в синтезе селенопротеина.

Важные функции селена

Рекомендуемые нормы потребления селена (Se)

Физиологические потребности в СЕЛЕНЕ согласно Методическим рекомендациям МР 2.3.1.2432-08 о нормах физиологических потребностей в энергии и пищевых веществах для различных групп населения Российской Федерации:

Таблица 1. Рекомендуемая суточная норма потребления селена в зависимости от возраста (мкг):

Источник

Селен — необходимый элемент для здоровья

Природа создала нас так, что уровень нашего здоровья поддерживают три основные защитные системы: антиоксидантная, иммунная и детоксицирующая. Каждая из них является многокомпонентной, и их деятельность регулируется огромным множеством факторов. Но есть среди них один, который мы вправе считать универсальным. Им является достаточная обеспеченность организма химическим элементом селеном.

Дефицит селена в организме является одной из ведущих причин того, что обычный воздух, которым мы дышим, и который поддерживает нашу жизнь, становится нашим страшным врагом. В условиях дефицита селена кислород воздуха через свои активные формы разрушает в организме большинство витаминов, нарушает деятельность иммунной системы и системы обезвреживания внутренних шлаков организма. Иммунная система в условиях дефицита селена теряет свои функции, нарушается обмен йода, а зависимая от него щитовидная железа, регулирующая обменные процессы, снижает свою функциональную активность, что отрицательно отражается на росте и развитии организма.

Дефицит селена у человека приводит к развитию десятков заболеваний, начиная с повышенной ломкости капилляров и неподвижности сперматозоидов, преждевременного выпадения волос и женского бесплодия и кончая анемией, диабетом, эндемическим зобом, гепатитами, инфарктом миокарда и инсультом, рядом онкологических заболеваний.

Всемирная Организация Здоровья рекомендует ежедневное потребление селена не менее 70 мкг в сутки для взрослых мужчин, 55 мкг для женщин, 65 мкг для беременных и 75 мкг для кормящих женщин.

В настоящее время недостаток селена, как правило, восполняется различными способами, в том числе внесением в различные минеральные и минерально-витаминные добавки к пище неорганических соединений селена в виде селенита и селената натрия. При всей полезности последних они обладают рядом существенных недостатков: высокой токсичностью, малосовместимостью с витаминами, нерегулируемым поведением в организме.

После долгого научного поиска было синтезировано гетероциклическое соединение 9-фенил симметричный октагидроселеноксантен (селенопиран, СП-1). В настоящее время он утвержден в РФ как компонент биологически активных добавок (Сан. Эпид. заключение № 77.99.03.241.Б.000329.10.03 от 31.10.2003 г.). Исследования выявили, что селенопиран менее токсичен, чем селенит натрия в 77 раз, не является аллергеном, не провоцирует развитие опухолей, напротив, обладает способностью к защите печени и в некоторой степени профилактическим действием при опухолевых заболеваниях.

В отличие от неорганических форм селена, селенопиран нерастворим в воде, но растворим в жирах. Это позволяет ему на существенно больший срок задерживаться в организме. Для селенопирана характерно медленное высвобождение селена из состава молекулы, поэтому он является, как бы, временным резервом селена. Селенопиран неактивен по отношению к микроорганизмам, и поэтому не может быть причиной кишечных дисбактериозов. В отличие от неорганических соединений селена, он не повышает кислотности желудочного сока.

Самым главным преимуществом БАД на основе селенопирана является то, что использование селена организмом происходит после высвобождения его из молекулы селенопирана, и лишь в моменты, когда микроэлемент по-настоящему необходим. Высвобождение селена из связанного состояния и его вовлечение в биохимические процессы происходит в стрессовых ситуациях, вызванных болезнями, эмоциональными нагрузками и нервными срывами, при отравлениях и приеме недоброкачественной пищи, а также в случаях тяжелой физической нагрузки. Если организм находится в здоровом равновесном состоянии, селенопиран подвергается замедленному превращению. При этом реализуется обязательный принцип медицины «Не навреди». Это основное преимущество добавок позволяет охарактеризовать их как «Селен по вызову».

В первую очередь антиоксиданты показаны при острых и хронических заболеваниях с развитием окислительного стресса.

Это заболевания, сопровождающиеся гипоксией и повышенным образованием кислородных радикалов:

Дозировка может варьировать в зависимости от тяжести состояния больного. Длительность приема также различается – от 1 месяца в профилактических целях во время эпидемий вирусных инфекций, до 3-4 месяцев при туберкулезе и хронических заболеваниях сердечно-сосудистой системы.

Источник

Селенопиран что это такое

В современных условиях здоровье человека во многом определяется качеством продуктов питания, содержащих все необходимые микроэлементы, в том числе и селен. Учитывая, что до 80% населения России имеет недостаточную обеспеченность селеном [4; 12; 16], в настоящее время проводится синтез и использование органических форм селена для профилактики селенодефицита и ряда заболеваний (беломышечной болезни, некроза и жирового перерождения печени, экссудативного диатеза, энцефаломаляции, расстройства сперматогенеза и др.) [1; 6; 15].

Интерес к селену и его соединениям связан с перспективами их использования в медицине, ветеринарии и сельском хозяйстве. Основной функцией селена и селенсодержащих соединений является их участие в синтезе селенопротеинов и селеноферментов, защищающих клетки от действия активных форм кислорода, ионов тяжелых металлов и других токсикантов.

Главным антиоксидантным селенозависимым ферментом является глутатионпероксидаза (ГПО), способная разлагать токсичную перекись водорода до двух молекул воды.

Однако исследования последних лет показывают [21; 22; 26; 27], что перекись водорода является важной регуляторной молекулой и участвует в передаче рецептор-опосредованного сигнала в клетки.

Основная часть перекиси водорода в клетках образуется в процессе дисмутации супероксид-анион радикала (O2− ∙). Последний образуется в процессе функционирования дыхательной цепи переноса электронов (ЦПЭ) путем одноэлектронного восстановления кислорода ферментами комплексов I и III ЦПЭ, а также глицерол-3-фосфатдегидрогеназы. Большая часть супероксида обезвреживается с образованием перекиси водорода под действием Mn-зависимой супероксиддисмутазы (Mn-СОД) в матриксе митохондрий или под действием Cu/Zn-СОД в цитозоле.

Другим важным источником Н2О2 является НАДФН-оксидаза (Nox), участвующая в работе фагоцитирующих иммунных клеток за счет выработки большого количества супероксида, необходимого для уничтожения поглощенных патогенных клеток. НАДФН-оксидаза обнаружена на внутренней поверхности плазматической мембраны нефагоцитирующих клеток, где она связана с цитоплазматическими доменами рецепторов. Известны 7 НАДФН-оксидаз: Nox1-Nox5 и двойные оксидазы 1 и 2. При связывании специфического лиганда с рецептором НАДФН-оксидаза активируется и вырабатывает супероксид, который затем превращается в пероксид водорода под действием СОД. Недавние исследования показали [20], что перекись водорода может вырабатываться непосредственно при образовании лиганд-рецепторного комплекса. Образованный супероксид и/или перекись водорода вызывают активацию киназной активности комплекса, который запускает серию реакций фосфорилирования белков, специфичных для этого рецептора.

При связывании инсулина со своим рецептором на плазматической мембране адипоцита инсулин стимулирует кратковременный «взрыв» активных форм кислорода (АФК): супероксида и перекиси водорода. Это происходит благодаря тому, что инсулин активирует НАДФН-оксидазу (Nox4) для выработки супероксида, который затем превращается в перекись водорода. Это небольшое количество перекиси водорода служит вторичным посредником, который уменьшает активность фосфатаз с редокс-чувствительными остатками цистеина и таким образом увеличивает фосфорилирование компонентов сигнального каскада инсулина (рис. 1).

Поверхностные клеточные рецепторы, вырабатывающие АФК после активации, включаются эпидермальным фактором роста, фактором роста тромбоцитов, инсулиноподобным фактором роста, фактором роста сосудов и различными цитокинами.

АФК регулируют аутофагию, проникновение кальция в митохондрии и освобождение кальция из эндоплазматического ретикулума, который необходим для проведения кальциевого сигнала к митохондриям. АФК, образованные в митохондриальной ЦПЭ, выходят в цитоплазму, где они могут реагировать с молекулами-мишенями, чтобы запустить клеточный ответ.

Благодаря такому участию перекиси водорода в жизни клетки можно назвать ее новым вторичным посредником.

Концентрация перекиси водорода зависит от активности ГПО в различных тканях. Вместе с тем синтез ГПО напрямую зависит от поступления в организм селена и от метаболизма главного селен-транспортного белка селенопротеина Р (М=57кД, в его составе 10 или 11 атомов селена), который синтезируется, главным образом, в печени и обеспечивает периферические ткани селеном [29]. Селенопротеин Р представляет собой биомаркер селенового статуса, поскольку его концентрация в плазме повышается в ответ на различные пищевые формы и дозы селена.

Следовательно, комплекс между FoxO1а и его коактиватором PGC-1α играет чрезвычайно важную роль для транскрипционной регуляции как ферментов глюконеогенеза – глюкозо-6-фосфатазы (Г6Фаза) и фосфоенолпируваткарбоксикиназы (ФЕПКК) [23; 32], так и селенопротеина Р [28], обеспечивая гипотетическую связь между метаболизмом селена и углеводным обменом.

Можно предположить, что селенопротеин Р и низкомолекулярные соединения селена могут затрагивать инсулин-индуцированные сигнальные пути, регулирующие углеводный и липидный обмены.

Кроме того, следует отметить, что повышение печеночного PGC-1α приводит не только к развитию гипергликемии, но и к нарушению гомеостаза селена. Например, антигипергликемическое средство метформин широко применяется для лечения сахарного диабета 2 типа, поскольку он подавляет выработку печенью глюкозы и повышает чувствительность к инсулину периферических тканей. Параллельно с глюконеогенезом метформин ослабляет биосинтез и секрецию селенопротеина Р in vitro, а также снижает биодоступность селена во внепеченочных тканях и за счет этого ослабляет экспрессию и активность селеноферментов in vivo [29].

Подводя итог, можно заключить, что поступление селена с пищей и/или в составе синтетических селенсодержащих препаратов приведет к усилению синтеза селенопротеина Р и ферментов глюконеогенеза в печени.

Действительно, в исследованиях с применением различных неорганических (селенит и селенат натрия) и органических соединений селена (диацетофенонилселенид и селенопиран), проведенных на различных животных и птицах (коровы, быки, свиноматки, овцы, утки, гуси и пр.), показано увеличение концентрации глюкозы в крови [2; 5; 7; 9; 10].

Однако наиболее выраженное увеличение содержания глюкозы в плазме крови демонстрировали только селеноорганические препараты. Вместе с тем применение препарата диацетофенонилселенид (ДАФС-25) также приводило к изменению ряда других показателей углеводного обмена: повышению содержания гликогена в печени и крови, снижению концентрации пирувата в крови, а также увеличению активности глюкозо-6-фосфатазы в печени белых беспородных мышей [2]. Большинство из вышеперечисленных биохимических изменений свидетельствуют об усилении реакций глюконеогенеза в печени и снижении поступления глюкозы в клетки периферических тканей, что согласуется с литературными данными, приведенными выше.

Как известно, соединения селена участвуют в синтезе ГПО, разрушающей перекись водорода, в результате чего снижается концентрация Н2О2, что приводит к активации фосфатаз (РТР-1В и РТЕN) и, как следствие, к дезорганизации внутриклеточной передачи инсулинового сигнала (рис. 2). Результатом этого является, с одной стороны, снижение концентрации инозитол-1,4,5-трисфосфата в цитоплазме клетки и нарушение включения транспортера глюкозы (GLUT4) в цитоплазматическую мембрану клеток жировой и мышечной тканей, а, с другой, изменение экспрессии генов ферментов углеводного обмена. Такое действие соединений селена сравнимо с действием природных и синтетических глюкокортикоидов, что позволяет рассматривать соединения селена как потенциальные гормоноподобные препараты.

Подробное изучение отечественной литературы, касающейся биологической активности органических и неорганических соединений селена, демонстрирует интересные закономерности: органические соединения селена (ДАФС-25 иселенопиран) оказывают большее влияние на показатели углеводного и липидного обменов животных, чем неорганические (селенит натрия).

Результаты по применению препарата ДАФС-25 [5; 7; 9; 10] демонстрируют достоверное увеличение концентрации глюкозы в плазме крови от 26% [10] до 55% [7] по сравнению с контрольными группами животных. Во всех перечисленных выше работах также показано увеличение в крови концентрации общих липидов, α- и β-липопротеинов, а также фосфолипидов. Кроме того, обращает на себя внимание значительное увеличение концентрации общего белка и его фракций в сыворотке крови животных, принимавших препарат ДАФС-25, от 50% [10] до 73% [9].

Применение неорганического селенита натрия [11] сопровождалось увеличением концентрации глюкозы (на 18,2%), общего белка (на 6,8%) и общих липидов (на 32%).

В работах [3; 8; 10; 13; 17] проводился сравнительный анализ влияния соединений селенита натрия и/или ДАФС-25 и/или селенопирана, показавших достоверное увеличение прироста живой массы в направлении селенопиран > ДАФС > селенит натрия по сравнению с контролем.

Особый интерес представляет работа Трошиной Т.А. [14], посвященная фармакокоррекции селенодефицита у животных препаратом ДАФС-25 и его влиянию на продуктивные качества, результаты которой показывают более высокий уровень активности гипофизарно-тиреоидно-надпочечниковой системы сельскохозяйственных животных и пушных зверей и полученного от них молодняка, а также активацию анаболических процессов и увеличение андрогенного статуса у жеребцов, обусловливающих их интенсивный рост. Кроме того, полученные результаты доказывают повышение адаптационных возможностей организма, стимулирование роста, активацию глюконеогенеза, за счет которого организм обеспечивался глюкозой на 85- 90% [14].

Таким образом, добавление в корма селеноорганических препаратов ДАФС-25 и селенопирана приводит к более значительному усилению роста животных по сравнению с селенатом натрия и контрольными животными.

Все вышеизложенное позволяет высказать предположение о возможном гормоноподобном действии препаратов ДАФС-25 и селенопирана. Анаболический эффект этих селеноорганических соединений, вероятно, обусловлен определенными чертами сходства препаратов с пространственной структурой нестероидных веществ, обладающих гормоноподобной активностью:

Диацетофенонилселенид (ДАФС-25) Селенопиран

Метилстильбол Хлортрианизен (тейс)

Вероятно, диацетофенонилселенид и селенопиран в оптимизированных конформациях способны взаимодействовать с рецепторами стероидных гормонов и через них оказывать гормоноподобное действие на клетки животных.

Подводя итог, можно сделать вывод о возможности взаимодействия различных по строению нестероидных соединений с лиганд-связывающими доменами рецепторов стероидных гормонов (андрогенов, эстрогенов и глюкокортикоидов). Дальнейшие исследования в этой области помогут выявить потенциальные гормоноподобные вещества нестероидной природы, обладающие анаболическим, андроген/эстроген-модулирующим и противовоспалительным действием, что позволит правильно оценить их биологическую активность и корректно использовать в медицине, ветеринарии, животноводстве, птицеводстве и других областях народного хозяйства.

Рецензенты:

Горошинская И.А., д.б.н., профессор, руководитель биохимической лаборатории ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Минздрава России, г.Ростов-на-Дону.

Коннова С.А., д.б.н., профессор, зав. кафедрой биохимии и биофизики ФГБУ ВПО «Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского» Минобрнауки России, г. Саратов.

Источник

Владельцы патента RU 2281007:

Изобретение относится к области технологии получения биологически активных соединений, используемых при производстве биологически активных добавок к пище (БАД к пище), функциональных продуктов питания, кормовых добавок с целью профилактики селеновой недостаточности у человека и животных.

В настоящее время всеобщее внимание исследователей и клиницистов привлекает микроэлемент селен, который является необходимым элементом для осуществления иммунологических процессов, для нормального функционирования антиоксидантной системы, монооксигеназной системы печени.

Однако указанные продукты имеют ряд недостатков. Неорганические соединения селена, например селенит натрия, обладают высокой токсичностью и связанным с этим риском токсических передозировок, а недостатком селенсодержащих водорослей и дрожжей является широкая вариабельность количества поглощенного селена. Отсюда возникают трудности с точным дозированием препарата и мониторингом эффективности профилактики и лечения. Кроме того, селенсодержащие аминокислоты сложны в получении и соответственно дороги.

Из уровня техники известно много способов получения различных соединений селена (авторские свидетельства СССР: № 325843, 963988, 1167184, 1246566, 1816762, патенты РФ: № 2221793 и 2226192).

В авторском свидетельстве СССР № 1051089 описан способ синтеза солей селенопирилия, получаемых при обработке 1,5-дикетонов селеноводородом и хлористым водородом в среде уксусной кислоты в отсутствие водорода. Указывается, что целевые продукты могут представлять интерес в качестве биологически активных веществ или полупродуктов при синтезе лекарственных средств.

Однако на практике имеет место преимущество селенопирана над солями селенопирилия и селенофеном, так как было установлено, что эти соединения не обладают ни антиоксидантными, ни иммуномодулирующими, ни детоксициирующими свойствами, характерными для селенопирана. В связи с этим данные соединения не нашли адекватного применения ни в медицине, ни в ветеринарии, ни в пищевой промышленности.

Наиболее близким к предлагаемому способу является способ получения 9-фенил-симметричного октагидроселеноксантена взаимодействием 9-фенил-симметричного октагидроксантена с селеноводородом и соляной кислотой в смеси ледяной уксусной кислоты и уксусного ангидрида в соотношении 4:1 (патент РФ №2213092).

Недостатком этого способа является длительность процесса, значительный расход дорогостоящего уксусного ангидрида и низкая конверсия селеноводорода из-за ее разложения в присутствии воды, которая содержится в соляной кислоте, при недостаточной кислотности реакционной смеси на стадии насыщения газом.

Кроме того, известные способы получения селенопирана не могут обеспечить производство соединения с широким спектром биологически активных свойств и получение целевого продукта с чистотой не менее 99,2%, а также не могут обеспечить многотоннажное промышленное производство конечного продукта без снижения его качества и выхода, значительных временных и материальных затрат.

Известен противоопухолевый фармацевтический препарат, содержащий селен в виде соединения селенофена (заявка WO 97/46225). В патенте RU №2213092 упоминается возможность получения фармацевтического препарата, предназначенного для регуляции обмена веществ, и который может быть использован для устранения селеновой недостаточности. Данный фармпрепарат является наиболее близким аналогом для заявленного препарата, однако он неэффективен и имеет низкое качество.

Из авторского свидетельства СССР №1526626 известна кормовая добавка для коров, содержащая витамины A, D, Е, сульфаты меди, цинка, кобальта, йодид калия и селенит натрия. Однако ее недостатком является отсутствие стабильного содержания селена в добавке за счет его свободного состояния, а также ограниченное видовое применение.

Наиболее близким аналогом для заявляемой кормовой добавки является кормовая добавка, содержащая селенит натрия (патент RU №2164758). Данная порошкообразная композиция применяется для профилактики селеновой недостаточности у сельскохозяйственных животных и птиц, однако обладает рядом недостатков, а именно низким качеством, недостаточным содержанием селена и наличием побочных эффектов.

Кроме того, не один из вышеприведенных источников информации не решает задачи, поставленной в заявляемом изобретении.

Учитывая недостатки способов получения соединений селена из предшествующего уровня техники, авторами настоящего изобретения был разработан новый недорогой и эффективный способ. Согласно этому способу получают биологически активное вещество, которое также является предметом заявляемого изобретения. Биологически активное вещество включает низкомолекулярное органическое гетероциклическое селеносодержащее соединение, полученное путем химического синтеза. Полное название 9-фенил-симметричный октагидроселеноксантен или селенопиран с формулой

Дополнительно после фильтрации маточный раствор разбавляют водой, а выпавший при этом осадок экстрагируют эфиром, затем эфирный экстракт сушат и отгоняют растворитель, после этого остаток перекристализовывают из ацетона и объединяют с полученным ранее целевым продуктом.

По сравнению с ближайшим аналогом усовершенствование способа состоит в том, что имеет место синергетический эффект, который заключается в том, что увеличивается конверсия селеноводорода за счет замены концентрированной соляной кислоты газообразным хлористым водородом, что, в свою очередь, позволяет снизить расход количества вводимого уксусного ангидрида в 2 раза. Кроме того, поставленная задача достигается путем обработки 9-фенил-симметричного октагидроксантена именно смесью газов селеноводорода и хлористого водорода и введением уксусного ангидрида на конечной стадии синтеза. При таком методе ведения синтеза уменьшается расход селеноводорода на 20-25% и сокращается длительность ведения процесса синтеза на 1-1,5 часа и соответствующие материальные затраты на него. Вместе с тем, неожиданно повышается выход целевого продукта и его качество (чистота), а содержание селена в селенопиране составляет 23,2-24,0%.

Получаемое согласно заявленному способу биологически активное вещество проявляет антиоксидантные свойства in vivo, стимулируя ферментативную и неферментативную системы организма человека и животного.

Получаемое согласно заявленному способу биологически активное вещество проявляет также и иммуномодулирующие свойства, поскольку установлено, что в условиях окислительного стресса селенопиран препятствует снижению количества Т-лимфоцитов и иммуноглобулинов С-, М- и А-классов в организме животных и человека.

Получаемое согласно заявленному способу биологически активное вещество проявляет также и иммунокоррегирующие свойства, поскольку установлено, что после проведения химио- и лучевой терапии восстанавливает количество Т-хелперов и нормализует соотношение Т-хелперов и Т-супрессоров, функционирование фагоцитирующих клеток и количество лейкоцитов крови. При этом у возрастных животных проявляется антиапоптозное действие на клетках тимуса, продлевая срок жизни Т-клеток.

Кроме того, получаемое согласно заявленному способу биологически активное вещество обладает также анаболическим эффектом, поскольку обеспечивает плавное наращивание мышечной массы и обеспечивает тонус мышц.

Таким образом, все вышеизложенное и является техническим результатом заявленной группы изобретений, поскольку обеспечивает решение поставленной задачи, и в том числе создание высокоэффективного способа промышленного получения селенопирана с рядом биологически активных свойств, высоким выходом целевого продукта и сокращение длительности процесса его производства. Наряду с этим введение полученного селенопирана в ряд продуктов функционального пищевого, кормового и медицинского назначения обеспечивает им системный профилактический, а также лечебный эффект без побочных последствий, что доказано нижеследующими примерами.

Пример 1. Способ получения селенопирана.

Суспензию 15,9 г 9-фенил-симметричного-октагидроксантена в 93,5 мл ледяной уксусной кислоты в инертной атмосфере насыщают 15 минут сначала хлористым водородом со скоростью пропускания 1,5 литра в час, а затем 15 минут смесью газов селеноводорода и хлористого водорода с такой же скоростью. После этого пропускают 2 часа селеноводород. Оптимальная температура реакционной смеси 40°С. После растворения 9-фенил-симметричного-октагидроксантена в реакционную смесь вносят 6,5 мл уксусного ангидрида и 30 мин насыщают селеноводородом. Выпавший обильный кристаллический осадок отфильтровывают и перекристализовывают из ацетона с фильтрацией горячего раствора через фильтр Шотта №4. Перекристаллизация из ацетона требует растворения исходного продукта в ацетоне при его кипячении, затем сразу проводят фильтрацию горячего раствора ацетона для того, чтобы растворенный исходный продукт прошел через фильтр, а нерастворившиеся примеси остались на фильтре.

Пример 2. Способ получения селенопирана.

Пример 3. Антиоксидантные свойства селенопирана.

Для получения данных об антиоксидантных свойствах селенопирана в условиях in vivo авторами проводилось специальное исследование, в котором был смоделирован кормовой стресс у цыплят-бройлеров (таблица 1).

Результаты исследований показали, что при введении в рацион окисленного жира (1 опытная группа) наблюдалось резкое снижение активности ферментов антирадикальной системы защиты (супероксиддисмутазы (СОД) и глутатионпероксидазы (ГПО)), что свидетельствовало о высокой интенсивности протекания свободнорадикальных процессов, высокой концентрации пероксидов и истощении ферментативной системы организма цыплят.

Антиоксидантные свойства селенопирана (вторая опытная группа) способствовали снижению количества свободных радикалов и концентрации пероксидных продуктов.

Таким образом, был доказан антиоксидантный характер селенопирана, обусловленный электродонорными свойствами его молекул, проявляющийся опосредовано через стимуляцию селенсодержащей ГПО.

Пример 4. Функциональный пищевой продукт с селенопираном.

Пример 5. Иммуномодулирующие и иммунокоррегирующие свойства селенопирана.

В условиях стресса соединения селена стимулировали синтез иммуноглобулинов М-класса у поросят, ягнят и бычков, а селенопиран (в отличие от селенита натрия) увеличивал также и концентрацию иммуноглобулинов А-класса.

Иммуномодулирующие свойства селенопирана были продемонстрированы в опытах на лабораторных животных. Так кормление мышей в течение 21 дня селенопираном достоверно и дозозависимо повысило число антителообразующих клеток селезенки в ответ на иммунизацию эритроцитами барана. При дозе 200 нг селенопирана в сутки на голову этот показатель составил 120 клеток на 10 млн. клеток селезенки по сравнению с тридцатью в контроле. Достоверное повышение антителообразующих клеток отмечено и в лимфатических узлах.

При вторичном иммунном ответе на Т-зависимый антиген оба препарата также оказали стимулирующий эффект. Число антителообразующих клеток, как в селезенке, так и в лимфатических узлах возрастало дозозависимо.

Иммунокоррегирующие свойства наиболее выражено проявились на старых мышах (возраст самцов 18 месяцев). Количество антителообразующих клеток в селезенке при введении селенопирана в дозе 200 нг/на мышь увеличилось в 10 раз. В лимфатических узлах эффект был менее выражен, чем в селезенке.

Однако было установлено, что при введении селенопирана наблюдалось повышение экспрессии рецептора фактора некроза опухолей на клетках лимфатических узлов и селезенки. Учитывая это, были проведены дополнительные исследования по выявлению взаимосвязей между экспрессией рецепторов фактора некроза опухолей, селенопираном и сигнальными путями апоптоза (программированной гибели клеток).

Известно, что данный рецептор инициирует четыре сигнальных пути, два из которых сцеплены с сигналами апоптоза, а другие проводят активационные стимулы. Апоптоз индуцировали введением рекомбинантного фактора некроза опухоли альфа. Результаты исследований показали, что препарат селена снижает негативное воздействие фактора некроза опухоли на число апоптозных клеток тимуса. Селенопиран снижает количество клеток, вышедших в апоптоз с 14 до 8% при дозе 10 ммоль рекомбинатного фактора некроза опухолей и с 21 до 11% при дозе 20 ммоль.

Таким образом, был сделан вывод, что повышение экспрессии рецептора фактора некроза опухолей связано с активационными процессами и не увеличивает процент клеток, выходящих в апоптоз. Напротив было продемонстрировано антиапоптозное действие селенопирана на клетках тимуса.

Пример 6. Гиполиподемическое действие селенопирана.

Гиполиподемическое действие селенопирана доказано клиническими испытаниями биологически активного вещества.

Исследования выполнялись на следующих группах больных:

Больные опытной группы получали противоатеросклеротическую диету и дополнительно селенопиран в дозе 420 мкг в сутки. Больные контрольной группы получали аналогичную диету и плацебо.

За период клинических испытаний (30 дней) не было отмечено ни одного случая непереносимости препарата, аллергических реакций и других побочных явлений.

Анализ динамики показателей липидного обмена свидетельствует о явно выраженном гиполиподемическом эффекте. Так, содержание холестерина в сыворотке крови достоверно снижалось на 14% по сравнению с контролем. Наблюдалось также выраженное снижение уровня холестерина ЛПОНП атерогенного типа и триглициридов у больных опытной группы на 38 и 37% соответственно. Отмеченные изменения привели к снижению коэффициента атерогенности на 17% (таблица 3).

БАД к пище может использоваться в качестве средства, обладающего гиполиподемическим эффектом. Например, БАД к пище содержит селенопиран в количестве 0,01-0,1 мас.%, витамин С 10-20 мас.% и витамин Е 1-5 мас.%. Дополнительные компоненты могут усиливать гиполиподемические свойства селенопирана.

При добавлении к селенопирану витаминов и набора макро- и микроэлементов в количествах суточной потребности в 1 таблетке готовят витаминно-минеральный комплекс,

например такой как «Центрум».

Пример 7. Антиатеросклеротический эффект селенопирана.

Антиатеросклеротический эффект селенопирана экспериментально был доказан на лабораторных крысах породы «Вистар». Первая группа служила контролем и получала полусинтетический рацион. Во второй группе использовали модель развития атеросклероза. Инициировали процесс высокожировым окисленным рационом путем введения холестерина (1% от массы корма) и предварительно окисленного подсолнечного масла. Рацион третьей группы был аналогичен второй, однако в жировой компонент вводили селенопиран.

Результаты макро- и микроскопических исследований аорты показали, что при визуальном осмотре аорт в группе, где был смоделирован атеросклероз без селенопирана, во всех образцах отмечалось уплотнение стенки аорты как в брюшном, так и в грудном отделах, а также снижение эластичности стенок сосудов. В этой группе при микроскопическом исследовании во всех образцах были отмечены очаговые утолщения стенки аорты в брюшном отделе и в меньшей степени в грудном, за счет разрастания соединительной ткани. Местами со стороны интимы отмечено наложение фибрина. Во всех образцах обнаружены признаки склероза ветвей брюшного отдела аорты. В целом в этой группе имелись все признаки атеросклероза в стадии формирования фиброзной бляшки.

БАД к пище может использоваться в качестве средства для профилактики атеросклероза. Биологически активная добавка к пище кроме селенопирана дополнительно может содержать полиненасыщенные жирные кислоты, такие как линолевая и линоленовая в количестве 45-58 мас.%. В качестве источника полиненасыщенных жирных кислот используются масла льна, расторопши пятнистой, облепихи, рыжика, подсолнечника. Концентрация селенопирана находится в пределах от 0,01 до 10 мг в одном миллилитре.

Пример 8. Биологически активная добавка к пище с селенопираном.

Биологически активная добавка к пище содержит 0,01-0,1 мас.% селенопирана, адаптогены растительного происхождения, в частности корни солодки в количестве 10-15 мас.%, порошка жмыха расторопши пятнистой 15-20 мас.%, порошка плодов черной смородины 10-15 мас.%, порошка моркови 20-25 мас %, листьев крапивы и земляники в количестве, обеспечивающих суточную потребность для организма человека в витаминах С, Е и каротина. Используются технологические компоненты для таблетирования. Полученная смесь таблетируется в виде таблеток или капсул и расфасовывается в герметические упаковки. БАД к пище (0,15 г в таблетке) назначают по 2-3 таблетки два раза в день.

Анализ доклинических исследований на лабораторных крысах показал, что заявленная композиция и ее количество достаточно для проявления иммуномодулирующих, адаптогенных и детоксициирующих свойств.

Пример 9. Анаболический эффект селенопирана.

Использование селенопирана в кормлении половозрастных бычков подтвердило анаболический эффект препарата. Селенопиран входил в рацион животных в дозе 0,4-1,2 мг/кг сухого корма. После 6 месяцев эксперимента живая масса опытных бычков превосходила контроль на 6,6% (таблица 5). Было установлено, что масса мясной части туши опытных животных превышала контроль на 4,0%, а площадь мышечного глазка на 12,7%. Анаболический эффект подтверждает химический анализ мышечной ткани. В длиннейшей мышце спины содержание общего белка выше в опытной группе по сравнению с контрольной группой на 8,0%.

Таким образом, использование селенопирана в кормлении животных увеличивает их живую массу за счет увеличения мышечной ткани.

Дополнительно проведенные клинические испытания позволяют утверждать, что селенопиран может быть рекомендован в составе БАД к пище в питании больных в послеоперационный период и спортсменов после операций и травм для восстановления тонуса мышц.

Пример 10. Фармацевтический препарат для устранения селеновой недостаточности.

Масляный раствор селенопирана является эффективным препаратом для коррекции нарушений иммунной системы при различных патологических процессах. Способ стимуляции и коррекции иммунной системы осуществляют следующим образом: полученный препарат в виде масляного раствора (используют смесь масел льна и расторопши пятнистой в равных количествах) вводят перорально. Доза зависит от клинического состояния больного, его возраста и веса. Суточная доза селенопирана составляет 1-120 мкг на 1 кг живой массы. Эффективная терапевтическая суточная доза для больного составляет от 0,05 до 5 мг активного вещества в 10 г смеси масел. Препарат вводят одномоментно или дробно. Длительность лечения может колебаться от 1 до 3 месяцев. В период проведения лечения контролируют иммунологический статус больного по развернутой клинической формуле крови и иммунограмме.

Таким образом, четко установлено, что в процессе лечения увеличивается количество Т-хелперов и Т-киллеров и уменьшается количество супрессоров, а также повышается количество лейкоцитов и нормализуется лейкограмма.

С помощью предложенного средства проведено лечение 16 больных, у которых иммунологическая селеновая недостаточность была обусловлена преимущественно инфекционной и опухолевой патологией.

Пример 11. Кормовая добавка с селенопираном.

Например, опыт был проведен на цыплятах-бройлерах кросса «Иза» с суточного до 36-дневного возраста. В контроле в комбикорм на кукурузно-пшеничной основе добавляли стандартный премикс П5-1 для первого возраста и П6-1 для второго возраста в опытной группе использовали премиксы, где селенит натрия заменяли селенопираном. Результаты исследований показали, что цыплята-бройлеры опытной группы к концу выращивания превосходили контрольных на 5% по живой массе и на 2,5% по сохранности. Выход потрошеного мяса в опытной группе увеличился на 1,5% и тушек первой категории на 2,8%.

3. БАД к пище по п.2, отличающаяся тем, что она выполнена в виде таблеток, порошков, капсул, леденцов, микрокапсул, пилюль, жевательной резинки, драже, водных и масляных растворов.

5. Функциональный пищевой продукт по п.4, отличающийся тем, что представляет собой растительное масло.

7. Кормовая добавка по п.6, отличающаяся тем, что она выполнена в виде гранул, порошков, водных и масляных растворов.

9. Комплекс по п.8, отличающийся тем, что он выполнен в виде таблеток, порошков, капсул, микрокапсул, драже, леденцов, пилюль, жевательной резинки, водных и масляных растворов.

предусматривающий приготовление суспензии 9-фенил симметричного октагидроксантена в ледяной уксусной кислоте, которую затем в инертной атмосфере насыщают в течение 15 мин сначала хлористым водородом, а затем в течение 15 мин смесью газов селеноводорода и хлористого водорода, после этого пропускают в течение 2 ч селеноводород, оптимальная температура реакционной смеси составляет 20-50°С, а общий расход селеноводорода составляет 2,3-2,6 л, после растворения 9-фенил симметричного октагидроксантена в реакционную смесь вносят уксусный ангидрид и в течение 30 мин насыщают селеноводородом, выпавший кристаллический осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из ацетона с фильтрацией горячего раствора через фильтр и получением селенопирана с выходом до 92-96%, чистотой не менее 99,2% и содержанием селена в целевом продукте 23,2-24,0%.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что дополнительно после фильтрации маточный раствор разбавляют водой, а выпавший при этом осадок экстрагируют эфиром, затем эфирный экстракт сушат и отгоняют растворитель, после этого остаток перекристаллизовывают из ацетона и объединяют с полученным в п.10 целевым продуктом.

13. Препарат по п.12, отличающийся тем, что он выполнен в виде таблеток, порошков, капсул, микрокапсул, драже, леденцов, пилюль, жевательной резинки, водных и масляных растворов, растворов для внутримышечных инъекций и энтерального питания.

Источник